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背景：

白細(xì)胞介素4（IL-4）是一種多效性細(xì)胞因子，主要由活化的T淋巴細(xì)胞，嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生。它是一種糖基化多肽，包含三個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵，并具有一個(gè)成束的四個(gè)α-螺旋結(jié)構(gòu)，除了在介導(dǎo)炎癥性過(guò)敏反應(yīng)中中發(fā)揮作用外，在腫瘤和自身免疫性疾病的治療和研究中也起著重要作用。小鼠的IL-4由24個(gè)aa信號(hào)序列:合成。IL-4對(duì)多種細(xì)胞具有多種免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)功能，在調(diào)節(jié)同種型轉(zhuǎn)換、誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IgE、誘導(dǎo)前體T輔助細(xì)胞分化等方面具有重要作用。IL-4可與膜結(jié)合型以及分泌型可溶性IL-4受體結(jié)合。

標(biāo)記：

1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。

2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合，獲得1×EdU溶液。

【注】：①不建議替換全部培養(yǎng)基，這樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜。

3.孵育細(xì)胞2 h，棄培養(yǎng)基。

【注】：①培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時(shí)間。

4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次，每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。

【注】：對(duì)于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 將細(xì)胞以 104-105 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種在 96 孔板 中，加入 100μL 培養(yǎng)基，含或不含待測(cè)化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細(xì)胞 24 小時(shí)。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。

3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間（如 6、12、24 或 48 小時(shí)）。

4. 向板的每個(gè)孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時(shí)。

6. 在讀板之前，在定軌振蕩器上輕輕混勻。

7. 使用酶標(biāo)儀測(cè)量 450nm 處的吸光度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

EPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli，EPEC 1mgEPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli，EPEC) 普通大腸埃希菌菌體蛋白(非致病性)

GNB2L1 Protein Human 重組人 RACK1 / GNB2L1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)

IL23R重組大鼠 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

SDPR Protein Mouse 重組小鼠 SDPR 蛋白 (aa 2-180, His 標(biāo)簽)

S100A16重組人 S100A16 / S100F 蛋白 Protein

小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠3(VD3)檢測(cè)試劑盒

Humahyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4檢測(cè)試劑盒人大腸癌專(zhuān)一抗原4(CCSA-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織AURORA-A激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase,PDXPELISAKit人哆/哆醇B60酸酶(PDXP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔環(huán)0酸鳥(niǎo)苷(rabbit cGMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔C反應(yīng)蛋白(rabbit CRP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔環(huán)氧化酶-1(rabbit COX-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

重組小鼠白介素-4（無(wú)動(dòng)物源）（IL-4）EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白

GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白

大鼠轉(zhuǎn)酶(ALT)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ALT ELISA Kit

Mouse alpha mannosidase (alpha Manase) ELISA Kit 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠雌二醇(mouse E2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitfoR(Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor)ELISAKit人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體

通用型單核增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)試劑盒20次

ELISAKitTGF-β1大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1